Journal title
عنوان نشریه
Quarterly Journal of Science Kharazmi University
Literature & Humanities
http://jsci.khu.ac.ir
1
admin
doi
fa
jalali
1386
1
1
gregorian
2007
4
1
18
47
online
1
fulltext
fa
بررسی فعالیت پلی گالاکتورونازی و تنوع ژنتیکی 42 جدایه ایرانی قارچ Ascochyta rabiei
Study of Polygalacturonase Activity and Genetic Diversity of Forty-two Iranian Isolates of Ascochyta rabiei
«آسکوشیتا ربیی1» یکی از پاتوژنهای مخرب قارچی مزارع نخود ایرانی(Cicer arietinum L.) است. در تحقیق حاضر42جدایه ایرانی قارچ ا.ربیی2 شامل جدایههایی با شدت بیماریزایی زیاد3، کم4 و متوسط5 ، که قبلا پژوهش بیماریزایی آنها انجام شد، مورد بررسی قرار گرفت. آنزیم پلی گالاکتوروناز یکی از فاکتورهای مهم در شروع بیماری برقزدگی است. بنا بر این قارچها در محیط کشت مایع PZ6 (pH=4.5) به مدت 6 روز کشت شدند. حضور آنزیم پلی گالاکتورونازدرمحیط کشت بعد از استخراج، با استفاد ه از تست پلیت مورد تایید قرار گرفت سپس فعالیت PG با استفاده از روش کالمر تعیین شد. دسته بندی جدایهها براساس فعالیت PG با استفاده از روش UPGMA7 انجام شد. نتایج نشان داد با تعیین فعالیت PG میتوان جدایههای HV و WV هر استان را متمایز ساخت. در بررسی دیگر, استخراج DNA به روش دلاپورتا از میسلیوم انجام شد. سپس واکنش RAPD (چند شکلی تکثیر شده تصادفی DNA) با استفاده از12 پرایمر تصادفی 9- 10 نوکلئوتیدی صورت گرفت. پلی مورفیسم DNA در محصولاتPCR جدایهها با استفاده از روش UPGMA بررسی شد. نتایج نشان داد تکثیر DNA با استفاده از دو پرایمر Ar082 و Ar171 دارای بالاترین الگوی پلی مورفیک است. از سوی دیگر، اگرچه تنوع ژنتیکی بین جدایههای ا.ریبی قابل توجه است، اما الگوی پلیمورفیک این پرایمرها نمیتواند جدایههای HV را از WV متمایز نماید.
Ascochyta rabiei is one of the devastaining fungi pathogens of chick-pea (Cicer arietinum L.) crops. In the present investigation, forty-two Iranian isolates of Ascochyta rabiei fungi (including highly, weakly and moderate virulent isolates), whose pathogenisities were determined previously, were studied. Polygalacturonase is a main factor in the initiation of Ascochyta blight disease. Therefore fungi were cultured in Pectic Zymogram/PZ (with pH 4.5) medium for six days. PG presence in culture media confirmed by test plate. Polygalactoronase/PG activity assayed by Collmer methods. Clustring of isolates based on PG activity were performed by UPGMA (Unweighted pair grouped method by arithmatic average) method. Results indicated that PG activity differentiated HV from WV isolates from any province. Another study, DNA were extracted from mycelium by Dellaporta method, RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) reactions were performed by twelve arbitrary 9-10-mer primers. DNA polymorphism was studied in PCR products of the isolates using UPGMA method. Results showed that, the DNA amplification by RAPD (Ar171 and Ar082 primers) obtained high polymorphic pattern. On the other hand, genetic variability between isolates of A. rabiei was detectable but polymorphic pattern of these primers did not differentiate HV from WV isolates.
extracted from mycelium by Dellaporta method ,
extracted from mycelium by Dellaporta method ,
675
684
http://jsci.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-63&slc_lang=fa&sid=1